Indicação
de uso
O meio EE Broth Mossel
Enrichment, também conhecido como Caldo
de Enriquecimento de Enterobactérias segundo Mossel é utilizado para o cultivo
e enriquecimento de Enterobacteriaceae
em alimentos em ambiente de laboratório. O caldo EE Mossel não se destina ao
uso no diagnóstico de doenças ou outras condições em seres humanos. O caldo EE Mossel
está de acordo com os Requisitos Harmonizados da USP / EP / JP para pesquisa de
bactérias gram-negativas bile tolerantes em produtos farmacêuticos não estéreis.
O
caldo de EE Mossel Enrichment é preparado de acordo com a fórmula Mossel,
Visser e Cornelissen. A fórmula contém dextrose para facilitar o crescimento da
maioria das Enterobacteriaceae, assegurar
a detecção de Salmonella e outros
organismos negativos para lactose. O caldo de EE Mossel Enrichment deve ser
usado como caldo de enriquecimento, seguido de um meio seletivo; por exemplo,
Violet Ágar Biliar Vermelho.
A
enumeração de Enterobacteriaceae é de
grande preocupação em monitorar a condição sanitária dos alimentos. Enterobacteriaceae podem ser injuriadas em
procedimentos de processamento de alimentos, que incluem exposição a baixas
temperaturas, calor sub-marginal, secagem, radiação, conservantes ou
desinfetantes. A recuperação depende de uma ressuscitação adequada de células
danificadas. O EE Caldo Enriquecimento Mossel é usado para detectar e enumerar Enterobacteriaceae encontrados por
mililitro ou por grama de amostra de teste de alimentos ao pela Técnica de
Número Provável (MPN) com pré-enriquecimento. Em amostras de produtos farmacêuticos,
é usado como meio de pré-enriquecimento para detecção de Bactérias Gram
Negativas Bile Tolerantes.
Formulação
e Preparo
Fórmula
Aproximada Por Litro
- Hidrolisado de pancreático de gelatina - 10,0 g
- Dextrose - 5,0 g
- Bile de boi desidratada - 20,0 g
- Fosfato de potássico monobásico- 2,0 g
- Fosfato dissódico didratado - 8,0 g
- Verde brilhante - 15,0 mg
O hidrolisado de pancreático de
gelatina é uma fonte complexa de nitrogênio. A dextrose favorece o crescimento
de todas as Enterobacteriaceae
positivas e negativas à lactose. A bile bovina inibe bactérias gram-positivas
enquanto as bactérias gram-negativas indesejadas são inibidas pelo verde
brilhante. O forte tamponamento do meio de cultura pelos sais fostato impede
que o ácido formado mate a cultura.
O pH final é 7.2 ± 0.2
O preparo do meio deve seguir
as instruções do fabricante. Aqueça a 100°C em banho-maria ou vapor fluído
durante 30 minutos e esfriar imediatamente. Este meio não deve ser autoclavado
devido à presença de corante e bile.
Micro-organismos
Indicados para o Teste de Grow Promotion
Para verificar a esterilidade
dos meios de cultura, colocá-los em incubação por, no mínimo, 72 horas, na
temperatura adequada. Não deve haver turvação ou alteração de cor.
Os microrganismos citados pela
United States Pharmacopeia e Farmacopeia Brasileira para o teste de Grow
Promotion em EE Broth Mossel Enrichment são:
Para
promoção de crescimento (verificar a seletividade):
Pseudomonas
aeruginosa ATCC
9027;
Escherichia
coli ATCC
8739.
Para
verificar a capacidade inibitória:
Staphylococcus
aureus ATCC
6538.
Outros
micro-organismos podem ser inoculados, de acordo com a metodologia usada.
Inocule
no meio pequeno número (não mais de 100 UFC) do micro-organismo. Incubar na
temperatura especificada por não mais do que o menor período de tempo
especificado no ensaio de pesquisa de bactérias gram negativas bile tolerantes.
A produção de ácido faz com que a cor do meio EE Mossel fique amarela em uma
reação positiva. Uma reação negativa resulta em nenhuma mudança de cor e o meio
permanece verde.
Fontes:
Difco
& BBL Manual - Manual of Microbiological Culture Media – Second Edition
United
States Pharmacopeia 40ª ed. 2017
Farmacopeia
Brasileia 5ª ed. 2010
